背景说明外泌体Exosomes是指可以从各种细胞中分离并释放到细胞外的30-150nm的小囊泡其内含物包括复杂的RNA、蛋白质、脂质等。目前所有培养的细胞类型均可分泌外泌体且外泌体天然存在于体液中包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等。外泌体被视为特异性分泌的膜泡其广泛参与细胞间物质运输与信息传递调控细胞生理活动还具有抗原提呈、免疫逃逸、诱导正常细胞转化、促进肿瘤发生和转移等作用此外外泌体还可以作为“天然的纳米粒子”来进行药物递送。目前差速超速离心是外泌体分离方法中公认的“金标准”也是高分文章中首选的分离方法。分离之后需进行从物理特征到表面分子标志物的一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。图 外泌体组成示意图Ibrahim et al. 2016。常用外泌体鉴定方式透射电镜鉴定简称TEM适合外泌体双层囊膜超微结构观察通常为茶托型或一侧凹陷的半球形是外泌体重要标志之一。纳米颗粒跟踪分析简称NTA可保证外泌体原始状态检测速度快检测后提供外泌体粒径和浓度信息。分子标志物检测外泌体标志物包括四跨膜蛋白家族、细胞质蛋白、参与生物功能的分子以及细胞分泌的特异性蛋白等可采用Western blot、免疫荧光、流式细胞术、qRT-PCR、高通量测序、质谱等多重手段进行检测。外泌体标记或示踪目前常用的外泌体示踪方式为亲脂性染料标记其中PKH67绿色荧光/PKH26红色荧光染料可与外泌体的脂质双层膜稳定结合染色效果较好应用较广泛也可采用Di系列染料如DiI橙色荧光、DiO绿色荧光、DiD红色荧光、DiR深红色荧光等其中DiR可穿透细胞和组织可用于活体示踪。服务流程客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养——上清液收集——超速离心——外泌体收集——外泌体鉴定——出具实验报告服务内容及说明适用范围目前在各种健康与疾病模型中都发现外泌体通过分子信息传递扮演着重要角色此外外泌体还越来越多地被认为是疾病的生物标志物和预后因子具有重要的临床诊断和治疗意义。除此之外它们还有潜力被用于临床作为基因和药物递送的载体。
