HT-29 是结直肠癌研究里的“明星株”之一应用极广从 3D 培养、高通量筛选到毒理学、转染宿主都能见到它。它有个特点是成簇生长、贴壁较慢新手容易被“怎么长不满”“怎么一堆漂浮”搞懵。HT-29 是人结肠癌细胞1964 年由 J. Fogh 从一名 44 岁白人女性结肠直肠癌患者的原发肿瘤中用移植培养法分离。它合成 IgA、CEA、TGFβ 结合蛋白和黏液素c-myc、K-ras、H-ras 等癌基因阳性p53 密码子 273 有 G→A 突变。广泛用于 3D 培养、高通量筛选、癌症和毒理学研究也是常用转染宿主。细胞背景与来源来源人结肠直肠癌原发肿瘤。贴壁生长成簇生长胞体黑点较多正常现象。应用场景与研究价值肿瘤学结直肠癌发生、耐药、癌基因/抑癌基因研究。肠道功能黏液素分泌、肠道屏障、IgA 相关研究。3D/高通量/毒理3D 培养、药物高通量筛选、毒理学评价、转染宿主。培养特性与注意事项培养基McCoys 5a 10% FBS 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁、成簇生长很难长满汇合到 80% 就传代。传代PBS 润洗后用 0.25% 含 EDTA 胰酶37℃ 消化到细胞触角收回、部分脱落约 1-2 min再终止成簇的要轻轻吹散900 rpm 离心 3-5 min。换液 2-3 天一次。冻存程序性冻存液程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏37℃ 水浴至米粒冰块150g 离心 1-2 min。生物安全BSL-1人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。注意复苏恢复慢约一周期间漂浮细胞多换液时要离心收集接回贴壁慢建议 48 h 后再换液处理。HT-29 成簇生长、贴壁慢用验证过的体系能少折腾。尚恩生物SUNNCELL有 HT-29 现货货号 SNL-069配套专用培养基和 0.25% 含 EDTA 胰酶货号 SNT-002细胞 STR 鉴定齐全技术支持可指导消化。
